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定量检测HBV- DNA的临床意义
【字体: 】 点击数: 更新时间:2007-6-25 9:46:55


    什么是HBV-DNA呢?HBV是乙型肝炎病毒的英文缩写,DNA为脱氧核糖核酸的英文缩写,HBV DNA即乙肝病毒脱氧核糖核酸。

  HBV是嗜肝DNA病毒。乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)是指HBV的基因组,也就是含有HBV全部遗传信息的成分。它是由3200个“碱基对”组成,为环状部分双股DNA,分长的负链(L)和短的正链(S)。负链上有4个开放读码区(S区、C区、P区、X区)。

    S区又分前S1、前S2和S基因,分别编码乙肝病毒包膜上的前S1、前S2蛋白和HBsAg,三者合称为大分子蛋白,前S2蛋白和HBsAg称为中蛋白,HBsAg为主蛋白。C区编码HbcAg,前C区与HBeAg有关。P区编码DNA多聚酶(DNAP)。X区编码X抗原(HBxAg)。

  HBV DNA位于病毒的核心,与HBeAg几乎同时出现在血液中,为游离型HBV DNA,是乙肝病毒感染最直接、最特异和敏感的指标。在慢性感染的患者中,HBV DNA可以和肝细胞的基因整合,称为整合型HBV DNA。

  HBV DNA的检测方法有定性和定量两种。前者一般用斑点杂交法检测,它的原理是利用有标记的特异性探针与被检测样本中的HBV DNA结合,再通过显色显示检测结果。用该方法可检测到0.2~1pg的DNA,具有简便、快速、经济等特点,但不能进行定量检测,灵敏度不很理想。

    定量检测现多用荧光定量PCR,它通过用特异的引物与被检测样本中的HBV DNA结合。在一定条件下,在体外对HBV DNA进行扩增,同时它还设计标记有荧光的探针,该探针也能与样本中的HBV DNA结合,并每扩增一次就放出一个荧光信号,通过信号接受器、电脑程序处理后便可得出样本中HBV DNA的含量(拷贝数)。

  定量检测方法与定性检测方法相比,其灵敏度明显提高,可检测到100~1000拷贝数的DNA(一般HBV DNA>1000 copies/ml为阳性)。但它的费用高,需一定的实验设备和条件,且有时会因污染而得出假阳性结果。

  HBV DNA定量检测在临床上具有十分重要的作用和使用价值。通过分析检测结果,我们可以了解病毒的复制状况。例如,HBV DNA>1000 copies/ml或阳性,提示病毒有复制,而且拷贝数的高低与病毒复制的程度成正相关;若结果阴性,则表明病毒处于不活跃阶段,病情比较平稳。

  医生可以参考HBV DNA的检测结果,来决定是否需要给患者进行抗病毒治疗。如果患者转氨酶升高(特别是转氨酶高于正常值两倍以上者),HBV DNA>1000 copies/ml或阳性,则应予抗病毒治疗;对一些肝脏有进行性损害(经肝穿活检证实)、HBV DNA阳性的患者,即使肝功能正常,必要时也应考虑抗病毒治疗。

  HBV DNA还可作为判定抗病毒药物疗效的指标之一。如果抗病毒治疗3个月或半年,HBV DNA仍不转阴或下降少于2次方,则提示该药物抗病毒疗效欠佳,可考虑停药或换用其他抗病毒药。

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